Anexo LBM

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DELIMITACIÓN DE SECTORES PARA CADA TAREA Y FLUJO UNIDIRECCIONAL DE PERSONAS Y OBJETOS:

Idealmente el laboratorio debería estar dividido en 3 áreas:

  • preparación de muestras (extracción de ADN la mayoría de las veces)
  • preparación de cóctel de PCR y alicuotarla en los tubos
  • destapado de tubos de PCR y electroforesis en geles de los productos obtenidos.

Las 2 primeras áreas son englobadas como “sector de preamplificación”, mientras que la última constituye el “sector de postamplificación”. En nuestro laboratorio las áreas no están físicamente separadas pero si están delimitadas. El área de preparación de muestras está comprendida por 4 mesadas independientes ubicadas en el laboratorio principal. La preparación de reactivos para PCR se realiza en la cabina de flujo laminar horizontal. El área de postamplificación es la parte de la mesada donde se encuentran las cubas de electroforesis, fuentes de poder y transiluminador.
Debido a la alta sensibilidad de la técnica de reacción en cadena de la polimerasa (PCR) es fundamental evitar que productos de amplificación entren a los sectores de preamplificación. Una contaminación de las muestras procesadas o de la mezcla de reactivos para PCR con amplicones (productos de amplificación) puede dar como resultado la amplificación de productos no deseados. Lo mismo puede suceder si la mezcla de reactivos para PCR se contamina con trazas de muestras purificadas. Es fundamental entonces evitar que ácidos nucleicos purificados entren al área de preparación de reactivos. Por este motivo, y dado que en el laboratorio no existe la separación física entre las áreas, hay que extremar las precauciones con el flujo de materiales y personas entre las 3 zonas. Los guantes, tubos, tips, pipetas y cualquier otro elemento deben ser exclusivos de cada área, evitándose llevar cualquier elemento de la zona de postamplificación al sector de preamplificación. De la misma manera, elementos utilizados en la preparación de muestras no deben ser llevados al área de preparación de la mezcla para PCR.

EQUIPOS:

  • Cuando se vaya a utilizar un equipo por primera vez se deberá solicitar las instrucciones de uso a la encargada o a los responsables del laboratorio. En los sucesivo consultar la carpeta de Equipos donde se encontrarán las instrucciones de uso, registros de mantenimiento, registro de reparaciones, etc. para cada equipo.
  • Todos los equipos deben dejarse cubiertos con su plástico protector al finalizar su uso.
  • Los termocicladores deberán ser reservados con anticipación utilizando la agenda de turnos on-line. En el cuadro de reserva deberá indicarse el horario (lapso de uso), el usuario y cual de los termocicladores se utilizará.
  • El uso de los termocicladores deberá ser registrado en los respectivos Registros de uso, indicando fecha, horario, nombre del usuario y cualquier observación pertinente sobre el equipo.
  • Los baños de agua deberán llenarse con agua de la canilla al momento de utilizarse, y el día viernes de cada semana se vaciarán para evitar la acumulación de suciedad y descomposición del agua en su interior.

LAVADO Y ESTERILIZACIÓN DEL MATERIAL - UTILIZACIÓN DE ELEMENTOS COMUNES:

  • Los usuarios deben responsabilizarse de lavar y guardar el material de vidrio y las cubas de electroforesis que utilicen.
  • El material debe ser lavado con detergente no iónico, enjuagado varias veces con agua común y al menos una vez con agua destilada.
  • El material debe ponerse a secar en los escurridores presentes en cada sector. No deben colocarse en los escurridores objetos utilizados con alimentos.
  • Cuando sea necesario esterilizar material el mismo debe colocarse en una caja de telgopor que se encuentra en la Sala de Lavado, rotulada como “Material para esterilizar”. Debe darse aviso a la responsable técnica del laboratorio para que realice la esterilización.
  • Cuando un usuario agote material de uso común esterilizado debe dar aviso a la a la responsable técnica para que lo reponga.
  • Cuando un usuario necesite la preparación de soluciones generales para trabajar deberá solicitarlo a la responsable técnica.
  • Las gradillas de uso común NO deben utilizarse para almacenar muestras o reactivos en la heladera o freezer. Para ese fin deben utilizarse criocajas o gradillas propias de cada grupo de trabajo.
  • Después de utilizar las gradillas deben devolverse limpias a su lugar de almacenamiento.

RESIDUOS:

En el laboratorio existen 3 tipos de residuos:

  • Residuos comunes: todo tipo de material que no haya tenido contacto con sustancias químicas.
  • Residuos peligrosos: cualquier material que haya tenido contacto con reactivos del laboratorio.
  • Residuos patógenos: materiales que contengan o hayan tenido contacto con microorganismos (bacterias, hongos).

Éstos deben disponerse como sigue

  • Los residuos comunes se recolectan en bolsas de residuos de color negro. Hay cestos debajo de cada una de las mesadas de trabajo.
  • Los residuos peligrosos sólidos se recolectan en bolsas de residuos comunes, y están debidamente identificados en el sector de electroforesis y en un contenedor ubicado al lado de la campana de extracción de solventes. Los residuos peligrosos líquidos se colocan en bidones de plástico dispuestos para tal fin. Estos bidones deben llenarse solo hasta los 3/4 de su capacidad.
  • Los residuos patógenos se recolectan en bolsas de residuos especiales de color rojo. Hay un contenedor para residuos patógenos debajo de la pileta de lavado en la zona de electroforesis.

NO DEBEN ARROJARSE RESIDUOS COMUNES EN LOS RECIPIENTES PARA RESIDUOS PELIGROSOS O PATÓGENOS.

HIGIENE Y SEGURIDAD:

  • No deben consumirse alimentos ni beber, fumar o maquillarse dentro de ninguno de los sectores del laboratorio.
  • No se deberán guardar alimentos en el laboratorio, ni en las heladeras que contengan drogas.
  • Cubrir heridas y lesiones pre-existentes con apósitos impermeables antes de comenzar el trabajo.
  • Se deberá utilizar el cabello recogido y vestimenta apropiada para realizar trabajos de laboratorio (guardapolvo preferentemente de algodón y de mangas largas, zapatos cerrados).
  • Se deberán utilizar guantes apropiados para evitar el contacto con sustancias químicas o material biológico. Toda persona cuyos guantes se encuentren contaminados no deberá tocar objetos, ni superficies tales como: teclado de la computadora, teléfono, lapiceras, manijas de cajones o puertas, cuadernos, etc.
  • Es imprescindible mantener el orden y la limpieza. Cada persona es responsable directa de la zona donde ha trabajado y de todos los lugares comunes.
  • Las manos deben lavarse cuidadosamente después de cualquier manipulación de laboratorio y antes de retirarse del mismo.
  • No se permitirá pipetear con la boca.
  • Mientras se trabaja en cualquier ámbito del laboratorio se deben utilizar anteojos de seguridad y guardapolvo de manga larga.
  • Leer la etiqueta o consultar la ficha de datos de seguridad de los productos antes de su utilización.
  • Se deberán usar mascarillas descartables cuando exista riesgo de producción de aerosoles o cuando se manejen sustancias tóxicas.
  • La manipulación de solventes, ácidos u otras sustancias que pueden ser riesgosas por inhalación deben llevarse a cabo bajo la campana de extracción. Está disponible para quien la solicite una semimáscara de protección respiratoria con filtros para vapores orgánicos y gases ácidos.
  • Está prohibido descartar líquidos inflamables o tóxicos o corrosivos o material biológico por los desagües de las piletas, sanitarios o recipientes comunes para residuos. Estos deberán desecharse dentro de la cabina de extracción de solventes en botellas correctamente rotuladas con la identificación de la sustancia.
  • El laboratorio cuenta con un botiquín de primeros auxilios con los elementos indispensables para atender casos de emergencia.
  • Si se rompe material de vidrio y el mismo puede ser reparado se entregará a Luciana Caeiro para que lo lleve al taller de vidrio de la FCEF y N. Si hay que tirarlo se envolverá de manera segura antes de su desecho con los residuos comunes.
  • Dentro del laboratorio se debe mantener una actitud responsable: no realizar bromas peligrosas, no correr, no gritar.
  • Es obligatorio informar al responsable del laboratorio cuando se necesiten dejar equipos funcionando en ausencia del personal del laboratorio.

Además:


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